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2020年春节放假通知

各位尊敬的老师们: 您们好!   安隆科讯2020年春节放假时间定为1月20日-1月30日,1月31号(正月初七正式上班)。节假日期间如果您有什么需要咨询或者帮助以及有推荐文章或者反馈意见的,依然可以通过邮箱sales@anachro.com,或者通过微信公众号(安隆代谢组)给我们留言,我们会尽快回复您的消息!   提前祝各位老师新年快乐,万事如意,大吉大利! 微信公众号:安隆代谢组 咨询邮箱:sales@anachro.com    公司网站:www.anachro.com.cn 推荐文章或反馈意见可直接在公众号内留言投稿或发邮件给我们sales@anachro.com

2016春季培训班圆满结束

4月16-17日  武汉

武汉安隆科讯开展了为期两天的代谢组培训班活动,期间共有11位老师分别对代谢组学实验方法及操作流程、NMR基础及数据处理、LC-MS基础及数据处理、GC-MS基础及数据处理、统计学数据解析、代谢组学实验策略及文章、如何选择合适的统计学方法及脂质组学研究进展等方面进行了介绍。为保证培训班的质量,这一期实行小班授课,且每节课程都设有互动环节,大家可以对有疑问的地方当堂提问。培训班现场气氛十分活跃,随着课程的进行每每出现整齐的翻动书页的声音,这认真的氛围让在场的小编都感到与有荣焉~

这期培训班没有报上名的老师也别担心,安隆科讯计划每年开展4期培训班活动,期待下一期培训班能够与您相遇,如果您对我们的培训班有什么好的建议和意见,欢迎将您的建议发送到sales@anachro.com这个邮箱,我们会定期送上答谢小礼品哦~

培训班咨询电话:027-87258771   
培训班咨询 QQ:800082094
样本要求

 样本量要求

NMR平台 500ul/样
GC-MS平台 200ul/样
LC-MS平台 200ul/样

 样本收集

  1. 采集血样,静置30分钟,血液凝固;
  2. 取液体部分进行离心分离,4摄氏度,3000转每分钟(rpm),5分钟;
  3. 离心后取上层清液 (一般为淡黄色), 每个样本至少需取500微升生物量, 准确记录并进行编号。此过程中要求每个生物学重复样本所用的时间一致,而且血样在室温放置不超过3个小时,4摄氏度保存不应超过24小时,以防止血液中的代谢物发生变化。
  4. 冰冻样本,将血清样本至于-80度冰箱冰冻保存。

 注意事项

  1. 采血过程中注意消毒,防止微生物污染;
  2. 离心速率建议不宜过快,以免血细胞破碎;
  3. 准确记录每个样本收集的血清样本体积;
  4. 血清样本冰冻后避免反复冻融;
  5. 在运输样本过程提供冰盒干冰保证低温(环境);
  6. 如果制备血浆样本,NMR平台宜用肝素钠抗凝,GC-MS、LC-MS平台宜用EDTA抗凝; 如果计划做多平台检测分析,建议各平台都制备血清为宜,且需要提前分装保存;
  7. 用于NMR平台分析的样本如果储存在-80度环境超过3个月,则需要加入微生物抑制剂(建议添加叠氮化钠溶液(0.0025mol/L)20微升);用于GC-MS、LC-MS样本不应添加任何微生物抑制剂。

 样本量要求

NMR平台 50mg冻干粉/样=500mg鲜重/样
GC-MS平台 20mg冻干粉/样=200mg鲜重/样
LC-MS平台 20mg冻干粉/样=200mg鲜重/样

 样本收集

  1. 取得粪便样本后迅速放入液氮速冻;
  2. 迅速转入-80℃冰箱保存,期间不得反复冻融;
  3. 全程干冰运送。

 注意事项

  1. 粪便样本在肠道里形成时间和区段不一样,含有微生物的量以及形成的成分不一致,因此所选择样本的节段不同,最终测到的代谢物也会因为个体的差异性而比较大;
  2. 若不能确定是否选择同一节段的粪便样本,建议先取大量样本如8-10克鲜样,并将样本混匀后进行后续实验,避免带来的个体差异太大;
  3. 新鲜的样本因为含水量的差异,称量样本的质量会受到影响,建议先冻干粪便样本,再继续后续实验。

 样本量要求

NMR平台 50mg冻干粉/样=500mg鲜重/样
GC-MS平台 20mg冻干粉/样=200mg鲜重/样
LC-MS平台 20mg冻干粉/样=200mg鲜重/样

 样本收集

  1. 4℃下离心收集样本;
  2. 加入缓冲溶液或生理盐水(防止反渗透或细胞膜破碎)清洗样本3-5次,以去除培养液或胞外物质;
  3. 将装有清洗好的样本的离心管(盖好管盖)直接放到液氮罐中淬灭细胞(无需研磨,此项过程的目的是灭活);
  4. 将淬灭过的细胞样本放入-80℃冷冻5h以上,然后使用冷冻干燥机进行干燥,最终得到冻干粉末;
  5. 冻干粉仅需普通冰盒运输即可。

 注意事项

  1. 为得到最佳谱图质量以得到最好的分析结果,强烈建议每个生物学重复的冻干粉量在不计算管壁粘附的情况下,至少达到50 mg以上;
  2. 细菌样本量的含盐量保证低于0.9%;
  3. 细菌样本中不含金属如Fe、Mn、Ni等;
  4. 样本在清洗过程中尽量保证细胞不被破坏。
  1. 冷冻状态下(冰面)取600毫克新鲜样本于离心管中,放入-80℃冰箱中冷冻2h,使样本保持稳定的冷冻状态;
  2. 先把冷冻干燥机打开,调整温度至-50℃预冷,再取样本;
  3. 将样本放入装有干冰的保温盒内,运送到冷冻干燥机处;
  4. 在装样本的离心管盖上戳几个洞(直径5㎝的盖子留3个直径3㎜的孔洞,盖直径大一点的可以稍微多留一两个洞),以保证冷冻干燥机抽真空的时候不会喷样。
  5. 冷冻干燥72小时,可适当延长冻干时间,确保样本冻干(无水分)。
  6. 冰盒寄送。

 注意事项

  1. 为了防止操作过程中样本有损失造成的样本量不足的情况,在取样时尽量多取,如有条件则可取完后快速称量;
  2. 离心管盖预留的孔洞须小于样本直径,否则样本会被真空抽出;
  3. 冻干时间是依据型号为LABCONCO Freezone2.5的冻干机提供的,且冻干机维护的比较好,效能良好,效能稍低的冻干机应适当延长冻干时间;
  4. 由于是整块组织样本冻干,接触面积小,所以比颗粒或粉末样本冻干要慢,可以适当延长冻干时间,以防外部冻干后中心还有水分。

 样本量要求

NMR平台 500ul/样
GC-MS平台 200ul/样
LC-MS平台 200ul/样

 样本收集

  1. 对尿液样本进行编号以及做好临床样本的采样信息记录;
  2. 取尿液大于1mL,在4摄氏度保存,静置;
  3. 取1mL尿液进行离心分离,4摄氏度, 10000rpm, 5分钟; 离心后取500微升上层清液,并加入微生物抑制剂(建议加叠氮化钠溶液20微升(0.0025mol/L));GC-MS、LC-MS平台不添加任何微生物抑制剂;
  4. 冰冻样本,迅速将尿液样本置于-80度冰箱冰冻保存,直到实验。

 注意事项

  1. 为了排除样本(特别是女性样本)所引进的微生物干扰,NMR平台的样本需要加入微生物抑制剂;
  2. 尿液样本不能及时进行离心处理,务必放入到4摄氏度的冰箱中静置保存,但不宜超过24小时;
  3. 尿液样本在进行前处理时保证每个生物学重复样本所有的时间一致;
  4. 注意样本冰冻后避免反复冻融,如果需要做其他生化检测应提前分装保存;
  5. 临床样本需要记录的采样信息:
    性别; BMI; 年龄; 种族; 饮食结构; 过往病史; 是否有其他疾病干扰; 采样时间; 采样方式; 采样地; 采样量。

 样本量要求

NMR平台 50mg冻干粉/样=500mg鲜重/样
GC-MS平台 20mg冻干粉/样=200mg鲜重/样
LC-MS平台 20mg冻干粉/样=200mg鲜重/样

 样本收集

  1. 取得组织样本后迅速放入液氮速冻;
  2. 在液氮条件下将冻好的组织样本研磨成粉;
  3. 尽可能将样本研磨细腻和均匀;
  4. 液氮研磨过程中液氮不宜过少,防止样本研磨过程中融化;
  5. 液氮研磨成粉后,样本应在-80℃保存5h以上或过夜存储,然后再于真空冷冻干燥机中抽为冻干粉状态;
  6. 每个生物学重复需要提供至少50 mg/个的干粉生物量;
  7. 运输过程仅需要普通冰盒运输即可。

 注意事项

如果样本还需要做其他检测,应提前分装保存,不应反复冻融。

 样本量要求

NMR平台 50mg冻干粉/样=500mg鲜重/样
GC-MS平台 20mg冻干粉/样=200mg鲜重/样
LC-MS平台 20mg冻干粉/样=200mg鲜重/样

 样本收集

  1. 每个生物学重复取相同的一体积细胞悬浊液(至少保证1Volume = N×10e^7 cells, N>1。为得到最佳谱图质量以得到最好的分析结果,强烈建议每个生物学重复的冻干粉量在不计算管壁粘附的情况下,至少达到50 mg以上),离心收集后用生理盐水清洗3-5次,以去除胞外物质;
  2. 将清洗好的样本装入离心管中(盖上管盖),直接放入液氮罐中淬灭细胞 (无需研磨,此项过程的目的是灭活);
  3. 将淬灭过的细胞样本放入-80℃冷冻,然后使用冷冻干燥机进行干燥,最终得到冻干粉末。

 注意事项

  1. 细胞样本量的含盐量保证低于0.9%;
  2. 细胞样本中不含金属如Fe、Mn、Ni等;
  3. 样本在清洗过程中尽量保证细胞不被破坏。
  1. 准备研钵,药匙,冻存管,试管架,手套,液氮,泡沫保温盒;
  2. 将研钵,杵棒放入到泡沫保温盒中,向泡沫保温盒中加入液氮但液面不超过研钵,待液氮沸腾停止,即研钵和杵的温度与液氮达到平衡;
  3. 放入样本至研钵中,倒入少量液氮,研磨至粉末状。注意戴好手套研磨,以免冻伤;
  4. 研磨好的粉末样本迅速放入到已经编号且预冷的冻存管中。并快速的放入到-80度冰箱保存,以免样本融化。

 注意事项

  1. 研磨时需要尽可能用力,使样本能够磨得细腻和均匀;
  2. 注意不要使样本融化;
  3. 样本编号要提前准备好,以免混淆;
  4. 为了节省研磨时间,建议准备多个研钵同时磨样,但需要注意每个研钵研磨完一个样本后需清洗才能研磨下一个,避免样本混淆;
  5. 清洗研钵经验:先用无尘纸将研钵内固体粉末擦干净,然后用纯水仔细清洗3次(如有需要可增加次数),保证研钵和研杵都已清洗干净,然后用无尘纸将其擦干备用(此过程注意防冻伤保护)。