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2020年春节放假通知

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八类脂质的代表性结构

NIH(美国国立卫生研究院)2003年资助的“脂质代谢途径研究计划”项目提出的脂质分类系统:

Fatty acyls

脂肪酰类

Glycerolipids

甘油酯类

Glycerophospholipids

甘油磷脂类

Sphingolipids

鞘脂类

Saccharolipids

糖脂类

Sterol lipids

固醇脂类

Prenol lipids

异戊烯醇脂类

Polyketides

聚酮类脂质

Lipid Categories of the comprehensive classification system

(The number of structures in the LIPID MAPS database, 2015)
Lipidmaps数据库不同年份收录的脂质分子数量22500(2010)、40360(2015)

黄框标记为可实现绝对定性定量分析的脂质类型(无需额外提供标准品)

1. 脂肪酸(Fatty acid, FA)结构

2. GC-MS方法的检测流程

3. GC-MS方法检测FA的优势

3.1 稳定,可重现性好,通量高

3.2 同时监测保留时间与特征碎片离子,双重保障定性结果准确可靠

3.3 最终数据为绝对定性定量分析结果

3.4 可通过比对标准质谱数据库定性未知脂肪酸

4. GC-MS方法面临的难题

4.1 无法准确定量未知FA

4.2 需要采购标准品用于准确定性定量

1. 甘油三酯(Triacylglycerols, TAGs)结构

2. LC-MS方法的检测流程

原理注释:
Phenyl-Hexyl色谱柱是苯基己基键合硅胶固定相,其中苯环中的π电子可以和TAGs双键上的π形成络合作用,同时己基部分还能提供额外的疏水作用。在甲醇条件下,主要表现为络合作用,能将ECN相同但双键数不同的TAGs分开,在乙腈条件下主要表现为疏水作用,能将ECN不同的TAGs分开。

3. LC-MS方法检测TAGs的优势

3.1 单柱即可完成二维液相色谱的分离,显著提高峰容量和分离选择性,实现了相同ECN值的TAGs以及TAGs位置异构体(sn-1、sn-2和sn-3不同)的分离。
3.2 离线联用无需更换色谱柱,只需切换流动相就可实现两维间的转换,极大缩短了分析时间,提高了分析通量。
3.3 TAGs结构的高度可重复性(仅脂肪酸链会变化)使其质谱行为高度一致,通过碎裂机理,结合Lipidmaps数据库,即可实现准确定性分析。

3.4 建立校准曲线结合响应因子的TAGs准确定量方法。
3.5 最终数据为绝对定性定量分析结果。

4. LC-MS方法面临的难题

4.1 分离度和峰容量虽然在二维系统上有了很大提高,但仍旧无法完美解决TAGs的峰重叠问题。
4.2 对保留时间和质荷比完全一样的TAGs同分异构体,无法实现单个TAG的准确定量。

1. 甘油三酯(Triacylglycerols, TAGs)结构

2. Shotgun MS方法的检测流程

3. Shotgun MS方法检测PLs的优势

3.1 质谱直接进样,无需经过色谱分离即可实现检测,方便快速,通量高。
3.2 PLs结构的高度可重复性(确定PLs的class以后仅脂肪酸链会变化)使其质谱行为高度一致,通过碎裂机理,结合Lipidmaps数据库,即可实现准确定性分析。
3.3 使用加入双内标的方法,准确定量。
3.4 最终数据为绝对定性定量分析结果。

4. Shotgun MS方法面临的难题

4.1 对同个class的PLs,质荷比完全一样的同分异构体,无法实现区分和准确定量。